【石蜡切片的原理和基本步骤】石蜡切片是组织学研究中常用的一种技术,主要用于将组织样本制成薄片以便在显微镜下观察其细胞结构和组织形态。该方法通过将组织固定、脱水、透明、浸蜡和包埋,最终在切片机上进行切片。以下是石蜡切片的基本原理和操作步骤的总结。
一、石蜡切片的原理
石蜡切片的核心原理是通过一系列化学处理,使组织样本变得坚硬且易于切割。这一过程主要包括以下几个方面:
1. 固定:使用化学试剂(如甲醛)固定组织,使其保持原有的形态和结构。
2. 脱水:去除组织中的水分,为后续的透明和浸蜡做准备。
3. 透明:使用透明剂(如二甲苯)替代组织中的水分,使组织变得透明,便于石蜡渗透。
4. 浸蜡:将组织浸入熔化的石蜡中,使石蜡取代组织中的透明剂,增强组织的硬度。
5. 包埋:将组织嵌入石蜡块中,形成可切片的材料。
6. 切片:使用切片机将石蜡块切成薄片,通常厚度为4-6微米。
7. 贴片与染色:将切片贴附于载玻片上,并进行染色以增强细胞结构的可见性。
二、石蜡切片的基本步骤
以下是以表格形式展示的石蜡切片的主要步骤及其说明:
| 步骤 | 操作内容 | 目的 |
| 1 | 组织固定 | 使用固定剂(如10%福尔马林)固定组织,防止腐败和结构破坏 |
| 2 | 脱水 | 依次用不同浓度的乙醇(如70%、80%、95%、100%)脱去组织中的水分 |
| 3 | 透明 | 用二甲苯等透明剂替换组织中的乙醇,使组织透明并利于石蜡渗透 |
| 4 | 浸蜡 | 将组织浸入熔化的石蜡中,使石蜡渗透至组织内部,增强硬度 |
| 5 | 包埋 | 将组织包埋在石蜡块中,形成可切片的材料 |
| 6 | 切片 | 使用切片机将石蜡块切成薄片(一般为4-6 μm) |
| 7 | 贴片 | 将切片贴附在载玻片上,便于后续染色和观察 |
| 8 | 染色 | 常用苏木精-伊红(H&E)染色,显示细胞核和细胞质的结构 |
三、注意事项
- 每一步骤的时间和浓度需根据组织类型和实验要求进行调整。
- 切片时应保持刀片锋利,避免产生厚薄不均或碎屑。
- 染色过程中要注意染色时间和温度,以确保染色效果良好。
通过以上步骤,石蜡切片能够提供高质量的组织样本,广泛应用于病理诊断、科研实验和教学中。掌握其原理和操作流程,有助于提高实验的成功率和结果的准确性。


